“棉花纤维品质功能基因组学研究与分子改良”项目取得重要进展

  由我院棉花研究所主持的、国家重点基础研究发展计划“棉花纤维品质功能基因组学研究与分子改良”项目(简称棉花973项目)2005年年会近日在河南安阳召开。
  项目在棉纤维基因资源创制及品质性状遗传基础研究方面,培育、发掘特异纤维资源179份,其中,与纤维品质相关材料121份,与纤维发育相关材料25份,与纤维色泽相关材料13份。初步创造突变材料200余份,转基因和DNA材料118份,其中纤维突变材料79份,还包括了不育、矮化、彩棉、多抗等突变体,这些材料的创制为本项目的顺利完成提供了坚实材料保障。
  在转录组学和文库构建方面,获得了29,992个棉花EST,序列分析表明,其中有12,233个为独立EST,用cDNA芯片或RT-PCR技术证明有大量纤维特异表达或纤维发育期高表达基因,分析发现在169条代谢途径中,最多可能有12条在0.05水平上呈显著性纤维伸长期高表达特性,并用体外胚珠培养方法验证了其中关键性代谢途径对促进纤维伸长的作用,用酵母双杂交法研究了1-E2-E3蛋白降解复合体在棉纤维伸长中的作用,同时构建了纤维品质优良的海岛棉Pima90-53 BAC文库和陆地棉7235 BAC文库。
  在基因研究方面,已构建了12000个纤维发育时期高效表达的cDNA文库,并获得了100个与纤维发育有关的基因,发现GhPRP11 在纤维快速伸长期特异表达,转录因子GhTCP1及GhTCP2 基因在纤维伸长期特异表达,GhRLK1 在次生壁合成期特异表达,GhDET2能够促进纤维的长度和强度增加。超量表达GhGA20ox1基因,发现能够促进纤维起始,增加单个棉籽的纤维数目,反义抑制GhGA20ox1基因抑制纤维的早期生长。克隆了GhGA20ox2、GhSS3基因的启动子,并对GhPRPR40、GHSUB基因的启动子序列进行了分析,同时筛选出了20多个转录因子、与细胞壁和细胞骨架合成有关的目的基因。
  在棉纤维细胞蛋白质谱构建方面,已获得了开花后5、10、15、20天开花后的蛋白图谱,蛋白斑点分别达到1346、1316、1297、1321个。
  在棉纤维品质性状关键基因的功能验证方面,已掌握了高效的农杆菌介导、花粉管通道、基因枪轰击三种转基因技术方法,建立了棉花规模化转基因技术体系,多种转基因技术有效的组装,实现流水线操作,建立了高效、工厂化的棉花转基因技术体系,年产转基因棉花植株6000株以上,建立了快速基因功能验证体系,每年可对20个以上的目的基因进行功能验证,并已获得转纤维品质改良基因(GhPFN1-a,GhPFN1-s)植株500余株,2005年年初开始8个纤维改良基因的遗传转化。
  在分子改良方面,目前已对1200个标记进行了分离群体分析,1个月内将获得1000个以上标记的遗传图谱,定位5个与纤维品质性状相关的QTL;根据生化性状遗传研究,建立生化遗传辅助育种技术体系,选育优质新材料6个,获国家科技进步二等奖1项。

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